Polimorfizm w regionie promotora CTGF związany ze stwardnieniem rozsianym ad 10

Nasze badanie wskazuje, że CTGF, poprzez swoje działania biologiczne (np. Przeżycie komórek, różnicowanie i proliferację38) może przyczyniać się do patogenezy twardziny układowej w sposób właściwy dla każdego narządu lub komórki. W ten sposób rozregulowanie CTGF może bezpośrednio przyczynić się do procesów wywołujących uszkodzenia narządowe związane z autoimmunizacją w twardzinie układowej. Możliwym alternatywnym wyjaśnieniem stowarzyszeń, które obserwowaliśmy, jest to, że wpływ polimorfizmu CTGF nie przyczynia się do objawów choroby, o ile nie ma ukrytych uszkodzeń tkankowych określonego typu (np. Związanych z obecnością przeciwciał anty-topoizomerazą I). W celu rozwiązania tych problemów wymagane będą dalsze szczegółowe badania genetyczne funkcjonalne. Trzecią możliwością jest to, że SNP znajduje się w nierównowadze sprzężeń z innym wariantem funkcjonalnym. Pokazaliśmy, że obecność allelu C w pozycji -945 jest krytyczna dla supresji transkrypcyjnej genu CTGF i że w takiej supresji pośredniczy wiązanie Sp3. To zahamowanie doprowadziłoby do zmniejszenia wytwarzania CTGF i potencjalnej ochrony przed nadekspresją CTGF w zaburzeniach, takich jak twardzina układowa, w których uporczywa odpowiedź na gojenie się ran wydaje się być patologicznym procesem leżącym u podstaw. Takie funkcjonalne wyjaśnienie byłoby zgodne z obserwacją, że allel G jest związany ze sklerozą układową, w której na ogół obserwuje się nadekspresję CTGF. Tak więc, eksperymenty funkcjonalne, które opisujemy, nie tylko jednoznacznie demonstrują różnice w aktywności transkrypcyjnej alleli C i G i różnicowego wiązania DNA in vitro i in vivo, ale także identyfikują nowe główne miejsce represora w promotorze CTGF (allel C).
Nasze testy immunoprecypitacji chromatyny wykazały, że fibroblasty od pacjentów z twardziną układową miały ogólny stosunek wiązania Sp1 do Sp3, który był wyższy niż stosunek komórek od osobników kontrolnych. Na podstawie wcześniejszych doniesień, że Sp1 często działa jako silniejszy aktywator niż Sp3 i że Sp3 również często działa jako represor (w zależności od wiążącego miejsca i warunków), 39 większe przesunięcie w stosunku Sp1 do Sp3 prawdopodobnie zmieniłoby tempo transkrypcji i zarządzać wyższą aktywnością. Ta hipoteza jest zgodna z ogólnym wzrostem aktywności transkrypcyjnej CTGF w fibroblastach od pacjentów z twardziną układową, jak wykazaliśmy wcześniej, 23 i ze zwiększoną aktywnością wiązania Sp1.22,24 Z genetycznego punktu widzenia nasze testy immunoprecypitacji chromatyny wykazali, że stosunki wiązania Sp1 do Sp3 w obrębie każdego typu komórek były około trzykrotnie wyższe w stosunku do homozygotycznych komórek GG, jak w przypadku homozygot CC, co było zgodne z wyższą aktywnością transkrypcyjną z alleli G. Stosunek wiązania Sp1 do Sp3 w fibroblastach od pacjentów z twardziną układową z genotypem CC mieścił się w wyższym zakresie w komórkach od osobników kontrolnych z genotypem GG (Figura 2C). To odkrycie sugeruje, że wpływ polimorfizmu jest nałożony na podstawowy brak równowagi w układzie Sp1-Sp3 w fibroblastach płucnych od pacjentów ze stwardnieniem rozsianym.22
Na podstawie naszych wyników proponujemy model, w którym brak silnego miejsca Sp3 w kontekście promotora, tak jak w allelu G, mógłby zmienić równowagę podstawowego kompleksu transkrypcyjnego w kierunku ulepszonej transkrypcji (np. acetylacja lub fosforylacja) (Figura 2F) Z ewolucyjnego punktu widzenia porównanie sekwencji z ortologami CTGF innych gatunków sugeruje, że allel C, bardziej powszechny allel u ludzi, ewoluował ostatnio (patrz rysunek w dodatkowym dodatku). Chociaż to odkrycie wymaga potwierdzenia za pomocą obszerniejszych badań, oznacza to, że istnieje silna pozytywna selekcja i możliwość korzyści dla tego miejsca represora u ludzi.
Podsumowując, nasze badanie pokazuje bezpośredni związek genetyczny między CTGF a twardziną układową i identyfikuje genotyp ryzyka CTGF obejmujący polimorfizm w obrębie nowego miejsca represyjnego transkrypcyjnego replikatora Sp3. Allel G jest silnie związany z transkrypcyjną aktywacją CTGF i ryzykiem twardziny układowej, szczególnie u pacjentów z autoprzeciwciałami przeciw topoizomerazą I i zwłóknieniem płuc. Tak więc, nasze odkrycia nie tylko identyfikują nowy mechanizm regulatorowy regulujący aktywność promotora CTGF, ale także bezpośrednio umieszczają CTGF na genetycznej mapie choroby ludzi. Dane te dostarczają nowego wglądu w patogenezę twardziny układowej, w tym wskazówki dotyczące mechanizmów prowadzących do określonych podtypów choroby. Ponadto mogą one również odnosić się do mechanizmów leżących u podstaw wielu innych ludzkich zaburzeń ze składnikiem zwłóknieniowym.
[patrz też: lipobase cena, evra plastry cena, lipancrea 16000 ]